М.: Российская медицинская академия последипломного образования, 2004.Книга ставит целью дать обзор основных оптических методов и подходов фотометрического анализа, а также фотометров, используемых в клиникодиагностических лабораториях. Книга в значительной мере носит образовательный характер и может рассматриваться как учебное пособие по фотометрическим методам для студентов медико-биологических факультетов и специалистов клинической лабораторной диагностики. Материал подобран на основе опыта преподавания разделов клинической лабораторной диагностики курсантам циклов специализации и усовершенствования.Основные понятия
Физические основы оптических методов исследования веществ
Оптическое излучение. Свет.
Корпускулярно-волновой дуализм света
Волновые характеристики света
Квантовые характеристики света
Характеристики оптического излучения.
Глаз и его оптические свойства
Светотехнические характеристики оптического излучени
Связь между энергетическими и световыми характеристиками
Взаимодействие света с веществом.
Отражение и преломление света.
Рефракция света
Рефрактометр Аббе
Дисперсия света
Интерференция света
Интерференция в тонких пленках.
Интерференционный светофильтр.
Дифракция света.
Поляризация света.
Двойное лучепреломление.
Поляриметрия.
Поляриметр.
Рассеяние света. Мутные среды.
Определение светорассеивания.
Нефелометрия - измерение рассеянного света.
Турбидиметрия - измерение прошедшего света.
Поглощение и излучение света.
Квантовые постулаты Бора.
Линейчатые спекры атомов.
Спектр излучения ртутной газоразрядной лампы.
Спектральный анализ
Молекулярные спектры.
Полосатый спектр
Эмиссионная спектроскопия
Фотометрия.
Люминесценция и флуоресценция.
Фотоэлектрические явления в твердых телах
Тепловое излучение веществ.
Колориметрия.
Оптические свойства окрашенных растворов.
Основной закон колориметрии.
Цвет раствора.
Колориметрические методы измерений.
Визуальные методы.
Определение гемоглобина по цвету цельной капиллярной крови.
Определение гемоглобина методом Сали.
Определение гемоглобина оксигемоглобиновым или
гемиглобинцианидным методами на компараторе цвета.
Определение гемоглобина сапониновым методом на гемоглобинометре c серым оптическим клином.
Фотоэлектрические методы.
Физические принципы и методы фотометрии
Терминология
Закон Бугера.
Молярный показатель поглощения
Принцип аддитивности.
Измерение в многокомпонентных растворах.
Измерение в максимуме спектральной полосы поглощения.
Измерение на оптимальной длине волны.
Фотометрические методы биохимического анализа
Измерение по калибровочной кривой.
Правила построения калибровочного графика.
Метод сравнения стандартного и опытного образца.
Методы определения вещества без использования калибратора.
Фотометрические единицы.
Определение концентрации по молярному показателю поглощения.
Измерение скорости изменения поглощения.
Измерение по конечной точке (end point method)
1-точечное измерение на двухлучевом фотометре
Измерение с бланком (холостой пробой) на однолучевом фотометре.
Измерение с прозоной (assay with prozone check)
Двухволновое измерение с опорной длиной волны
Кинетические измерения (kinetic measurement).
Измерение по 2-точкам.
Многоточечное измерение.
Измерение по начальной скорости (initial rate)
Кинетический метод с коррекцией по бланку образца.
Турбидиметрия и нефелометрия
Кривая доза-эффект. (Калибровочный график, отражающий реакцию взаимодействия антигена и атитела).
Калибровочный график
Фотометрические схемы измерения оптического поглощения растворов.
Приборы и компоненты для фотометрического анализа.
Структурные схемы фотометров. Основные компоненты фотометров.
Особенности фотометрической схемы биохимических анализаторов
Компоненты фотометрических приборов
Источники света.
Тепловые источники света.
Галогеновые лампы.
Газоразрядные лампы
Дуговые ртутные лампы.
Светоизлучающие диоды.
Лазеры.
Спектральная фильтрация
Фильтры.
Монохроматоры
Призмы.
Дифракционная решетка.
Голографическая решетка
Полихроматор.
Тонкие линзы и зеркала
Линзы
Сферические зеркала.
Плоские зеркала.
Кюветы.
Приемники оптического излучения
Электровакуумные фотоэлементы.
Фотоэлектронные умножители.
Фотодиоды.
Волоконная оптика.
Устройства считывания
Регистрирующие устройства.
Приборы для фотометрического анализа.
Фотометры общего назначения.
Одно лучевые микроколориметры медицинские фотометрические МКМФ-1 и МКМФ-2.
Двух лучевой фотоэлектрический колориметр ФЭК-56.
Одно лучевой спектрофотометр СФ-46
Двух лучевой спектрофотометр Beckman DB
Фотометры и спектрофотометры специального назначения
Биохимический анализатор БиАн
Анализатор с вертикальным фотометрированием для ИФА
Платншетный анализатор с вертикальным фотометрированием
«Униплан»
Одноволновые анализаторы
Гемоглобинометры фотометрические портативные АГФ-03-1 МиниГЕМ
540 и АГФ-03-2 МиниГЕМ 523.
Бихроматические анализаторы.
Анализатор билирубина фотометрический неонатальный АБФ-04 Билимет К
Двухволновый отражательный анализатор Билитест 2000
Транскутанная билирубинометрия
Методика проведения транскутанной билирубинометрии.
Турбидиметрические анализаторы
Анализатор общего белка в моче Белур 600
Лазерный анализатор агрегации тромбоцитов АЛАТ2 БИОЛА
Факторы, влияющие на качество фотометрирования
Причины кажущихся отклонений от закона Бугера
Физико-химическая гетерогенность исследуемого раствора
Инструментальные погрешности
Установка длины волны
Влияние монохроматичности света
Рассеянный свет.
Линейность
Использование констант в фотометрическом исследовании.
Мениск в лунках планшетов
Температура.
Метрологические аспекты фотометрии.
Правильность фотометрических данных
Сходимость фотометрических данных
Воспроизводимость спектрофотометрических данных
Предел обнаружения и минимально определяемая концентрация
Оценка погрешностей определения активности ферментов кинетическим методом с применением линейной регрессии
Оценка систематических погрешностей определения активности ферментов
Сопоставление точностных характеристик лабораторных методов на примере исследования гемоглобина
Методы определения гемоглобина
Погрешности методов определения гемоглобина
Погрешности, связанных с присутствием разных форм гемоглобина
Погрешности преобразования гемоглобина
Приборные погрешности
Погрешности калибровки приборов
Погрешности дозирования крови и растворов
Контрольные материалы и их точностные характеристики
Суммарная погрешность измерений σ.
Средства контроля фотометрических приборов
Литература
