Учеб. пособие для студ. биол. фак. и фак. нано- и биомед. технол., обучающихся по напр. «Биология (020400)», «Биология-пед (050100)», «Биотехнические системы и технологии (200100)», «Медицинская физика (011200)» и по спец. «Биоинженерия и биоинформатика (020501)». — Саратов: Саратовский источник, 2013. — 84 с. — ISBN 978-5-91879-250-6.В учебно-методическое пособие включены работы для практикума по молекулярной биологии. Каждая работа содержит краткие теоретические сведения, информацию о необходимом оборудовании и материалах, данные о подготовке растворов реагирующих веществ и методике проведения эксперимента.
Для студентов биологического факультета и факультета нано- и биомедицинских технологий.Содержание
Введение
Выделение общей ДНК из клеток
Выделение ДНК из бактерий
Выделение ДНК из лимфоцитов крови
Выделение ДНК из растительных тканей
Концентрирование ДНК путём осаждения спиртом
Спектрофотометрия препаратов ДНК, РНК и белка
Спектрофотометрическое определение концентрации ДНК
Определение концентрации белка по собственной флуоресценции
Электрофорез нуклеиновых кислот
Приготовление агарозного геля
Гель-электрофорез ДНК
Выделение плазмидной и фаговой днк
Минипрепаративное выделение плазмидной ДНК (минипреп)
Выделение плазмидной ДНК в больших объѐмах (максипреп)
Выделение репликативной формы RF фага М13
Выделение одноцепочечной ДНК фага М13
Рестрикция ДНК
Рестрикция плазмидной и фаговой ДНК
Рестрикция геномной ДНК эукариот
ПЦР
Подбор праймеров для ПЦР
Проведение ПЦР-амплификации ДНК
Расчѐт праймеров и параметров ПЦР с помощью специальных программ
Клонирование генов
Подготовка ДНК вектора и гена
Лигирование ДНК вектора и гена
Рестрикционное картирование вставки ДНК в плазмиде
Трансформация бактерий
Приготовление компетентных клеток E.coli
Трансформация E.coli
Подготовка электрокомпетентных клеток E.coli
Электропорация E.coli
выделение рекомбинантного белка
Индуцированная экспрессия клонированных генов
Выделение белка из периплазмы клеток E.coli
Диализ препарата белка
Определение концентрации белка
Метод Бредфорда
Метод Лоури
Концентрирование белков путем осаждения ТХУ
Электрофорез белков
Приготовление растворов и заливка ПААГ
Гель-электрофорез белков
Окрашивание белков Coomassie R–250
Расчёты в работе с белками
Трансляция нукулеотидной последовательности
Предсказание нуклеотидной последовательности по аминокислотной
Анализ последовательности белка
Список рекомендуемой литературы
Приложения
